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食品中蛋白质含量测定中影响准确性因素有那些?????

答案:2  悬赏:0  
解决时间 2021-04-28 00:50
  • 提问者网友:唤魂
  • 2021-04-27 04:07
多谢回答
最佳答案
  • 二级知识专家网友:星星坠落
  • 2021-04-27 04:16

(1)蛋白质的不同对测定结果的影响。


由于蛋白质是生物大分子,而紫外吸收往往是其分子内的小基团所引起的,例如酪氨酸、苯丙氨酸,色氨酸和肽键等等。因此当蛋白质不同,其包含的上述小基团含量发生变化时,就会影响蛋白质含量的测定。然而蛋白质种类繁多,结构复杂,很难对其进行有效的归类。例如人体内含蛋白质的种类约有10万种,整个生物界的蛋白质种类估计有100亿种。


建议:测量过程中如果条件允许,应尽量使用相近的蛋白质做标准曲线,修正测量参数,以便得到更为准确的数值。


(2)溶液中干扰物质的影响。


由于蛋白质所包括的具有紫外吸收的小基团为常见基团,其产生紫外吸收的特异性并不强,很多具有类似结构的有机溶剂都会有类似的紫外吸收,如醇、酮、醛、醚、有机酸、酰胺类,这些混入蛋白质溶液都会对测量产生干扰。另外,一些高浓度的无机化合物也会对蛋白质的含量测定产生干扰,例如NaOH、NaCI等等。


建议:测量时应尽量排除干扰物质,同时选择合适的参比溶液。


(3)溶剂吸收的影响。


如果以一些在紫外区有吸收的物质做溶剂(例如醇、酮类),会对测量结果产生很大的影响。


建议:测量时尽量不要使用此类溶剂,或者在测量时选择合适的参比。


(4)PH对测定的影响。


PH变化时对蛋白质含量测定的影响非常大,例如:下图为Tyr的吸收谱线与PH的关系。由图可以发现,PH=6和PH=13时,光吸收度已经有了非常大的差异。


lmax at pH 6: 274 nm


lmax at pH 13: 295 nm


建议:测定样品时不要使溶液处于过酸或者过碱的状态,同时样品的PH值要与标准品的PH值尽量保持一致。


(5)环境极性、蛋白质构象、蛋白质折叠与变性都会对蛋白含量的测定产生影响。

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  • 1楼网友:24K纯糖
  • 2021-04-27 05:23
主要是其他含氮物质吧,比如尿素,三聚氰胺
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