胚胎移植后怀孕判定标准

胚胎移植后怀孕判定标准

为了及早判断胚移手术后的受体羊是否怀孕，提高母羊利用率和胚移效果，降低生产成本，采用B型超声波诊断仪对131只胚移手术后的受体羊和150只自然配种波尔母羊进行早期妊娠检查。胚移孕检结果表明:妊娠后28~32天检查，诊断准确率达95.7%;妊娠后40~45天检查，诊断准确率为97.6%。在生产中用B超对妊娠母羊进行诊断是完全可行的。关键词:B型超声波诊断仪早期妊娠诊断当前，在波尔山羊的胚胎移植中，及早判断手术后的受体羊是否怀孕是提高母羊利用率及胚移效果，降低生产成本的关键。以往判断母羊怀孕与否的常规方法是采用徒手触诊或情期观察的方法，具有早期诊断准确性差，易引起流产，未受孕母羊再利用率低，生产成本增加等弊端。目前国内外较为先进的妊娠诊断方法为B型超声波诊断技术，它是一种无痛苦、无损伤和比较安全的早期活体诊断方法，具有实时、直观和可靠性高以及扫描图像资料便于以后论证和分析等优点。目前该方法已在人医上得到广泛地的使用。在国外，超声波诊断技术已经较多地应用于哺乳动物胚胎工程和基因工程研究中的妊娠检查、孕期监测等方面。为了解决波尔山羊胚胎移植过程中早期妊娠诊断难的问题，我们在试验和生产实践中，采用B型超声诊断仪对手术后的受体母羊和自然配种波尔山羊进行了B型超声波检查，现将有关实施情况报告如下:试验时间、地点1时间2006年4~6月。2地点重庆市涪陵区辉强种羊场，重庆新科种羊场，重庆涪陵望月农业公司种羊场，涪陵区白涛、蔺市、卷洞等乡(镇)养羊农户。材料和方法1 材料实验动物为131头胚胎移植的受体本地山羊和150头自然配种波尔山羊。2 仪器设备超声诊断采用Ami-900兽用B型超声扫描仪，为加拿大Ami公司产品，超声耦合剂购于国内宁波。3 检测方法用B超分别对试验羊妊娠后28~32天，40~45天进行怀孕检查，所获图象作为孕检依据。首先将待查羊站立保定，排除直肠内的宿粪，B超探头涂耦合剂或用消毒水消毒润滑后缓缓送入羊直肠至骨盆入口前后向下呈45°~90°角进行扫查，使超声束透过直肠壁而获取子宫、卵巢及其周围组织器官的超声切面声像图。选择典型实时图像冻结保存，或用影像机打印，或用数码相机拍摄荧屏切面声图，并运用B超的电子测尺测定所需数据，最后经扫描仪扫描或直接输入电脑分类保存和处理。4 B超典型珍断图像展示5 图像分析与计算公式5.1 图像分析: 在未对机器系统作反底色转换条件下，通过以上B超扫描图显示，黑暗区代表液体、积液、羊水等，白色明亮区代表充气肠管、空腔、肠皱、气体等，灰暗或灰白区代表固体组织。5.2 孕检判断标准:以B超扫描获得孕囊、胚胎图像为怀孕(诊断阳性)，获得未孕子宫图像为未孕(诊断阴性)，未见孕囊、子宫图像或仅见肠管、空腔形像为可疑。以分娩作结果验证，少数以剖腹探查为准。5.3 计算公式A、诊断阳性正确率---最终确定怀孕数与B超检查所得怀孕数之比，简称为诊断阳性率;B、诊断阴性正确率---最终确定未怀孕数与B超检查所得未孕数之比，简称诊断阴性率;C、诊断准确率---B超检查结果中最终确认的怀孕数与未孕数总和与B超检查总头数之比。结果与分析我们共检查了131只移植了波尔山羊胚胎的受体羊和150只自然配种的本地母羊，这些羊分别在胚胎移植后的第28~32天、40~45天进行B超检查，检查结果分为“怀孕”、“未孕”、“可疑”三种。分别计算诊断阳性正确率、诊断阴性正确率、诊断准确率。检查结果见下表。胚胎移植后第28天检查以见到孕囊为判断妊娠的主要依据;胚胎移植28天以上的羊都可以见到孕囊、胎儿或胎儿心脏搏动、子叶为诊断依据(见图1)。同时随机选择农户家中150只自然配种的波尔山羊作对照。胚胎移植受体羊和自然配种波尔山羊B超妊娠检查结果种类 头数 孕期 B超检查结果 最终确认数/B超数
怀孕数 未孕数 可疑数 阳性率(%) 阴性率(%) 诊断准确率(%) 孕/孕 未孕/未孕
胚移受体自然配种 131150 28-3228-32 68104 6141 25 97.195.2 96.792.7 96.994.5 66/6899/104 59/6138/41
胚移受体自然配种 131150 35-4035-40 68104 6141 25 10098.1 96.893.1 98.596.7 68/68106/104 63/6144/41

从表上可知:1 妊娠28~32天检查时，胚移受体山羊B超检查阳性正确率、阴性正确率分别为97.1%、96.7%，诊断准确率为96.9%，与自然配种的山羊诊断准确率94.5%相比，差异不显著(p＞0.05)。2 当延后到妊娠35~40天检查时，胚移受体山羊B超检查阳性正确率、阴性正确率分别为100%、96.8%，诊断准确率为98.5%，与自然配种的山羊诊断准确率96.7%相比，差异不显著(p＞0.05)。3 妊娠28~32天平均诊断准确率为95.7%，妊娠35~40天平均诊断准确率为97.6%，相比略有提高，但差异不显著(p＞0.05)。4 妊娠28~32天诊断准确率为95.7%，妊娠35~40天诊断准确率为97.6%，分别与诊断准确率100%，相比，差异不显著(p＞0.05)。结果与讨论1 对于操作熟练者。可以在胚胎移植后28~32天左右进行，其诊断准确率95.7%。2 对于操作不熟练者。母羊妊娠28~32天时。由于这一时期的胎儿较小，且有些羊食草过多，瘤胃等内容物挤压腹部，诊断时只能根据出现孕囊来判断，而且此时孕囊体积较小，一般在B超图像上显示(8~12)×(12~16)mm左右，而且由于位置不同，很难发现胎儿及胎儿心脏搏动，极易出现误判。建议在母羊妊娠后40~45天进行，诊断准确率可达97.6%。3 根据以上结果，在生产中用B超对母羊进行妊娠诊断是完全可行的。对及早判断手术后的受体羊是否怀孕，提高母羊利用率和胚移效果，降低生产成本具有十分重要的意义。

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